产品货号：
QN1071
中文名称：
考马斯亮蓝G-250染色液
英文名称：
Coomassie Brilliant Blue G-250 Staining Solution for protein quantification
产品规格：
100mL|500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：2～8℃，有效期1年。
使用方法：
一、微孔酶标仪法
二、分光光度计法
如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。步骤如下：
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考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置，由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20,60,80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。
产品组成：
| 组分 | 100mL | 500mL |
| 考马斯亮蓝G-250染色液 | 100mL | 500mL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：2～8℃，有效期1年。
使用方法：
一、微孔酶标仪法
- 完全溶解蛋白标准品，取10μL，稀释至250μL，使终浓度为0.2mg/mL。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
- 考马斯亮蓝G-250染色液使用前请颠倒3～5次混匀，取1mL考马斯亮蓝G-250染色液，加入4mL双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
- 将标准品按0、2、4、6、8、12、16、20μL分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20μL。
- 将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
- 各孔加入200μL稀释后的1×G250染色液，室温放置3～5分钟。
- 用酶标仪测定A595，或560～610nm之间的其它波长的吸光度。
- 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
二、分光光度计法
如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。步骤如下：
- 取八支（或者更多）干净的10mL离心管，标记上号。
- 取100μLBSA加入PBS 2.4mL稀释至终浓度为0.2mg/mL。
- 考马斯亮蓝G-250染色液使用前请颠倒3～5次混匀，取10mL考马斯亮蓝G-250染色液，加入40mL双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
- 按下表加入试剂(以每孔5mL计，多余的用来清洗比色皿)。
离心管号 1 2 3 4 5 6 n(样品管n-6) 标准蛋白BSA(μL) 0 100 200 300 400 500 500 PBS(μL) 500 400 300 200 100 0 0 1×G250染色液 5mL - 反应3分钟后测OD值。为了实验的准确性，可每间隔2分钟加一管染色液，每间隔2分钟测一管OD值。如下表：
离心管号 1 2 3 4 5 6 7 8 n 加染色液(分钟) 0 2 4 6 8 10 12 14 2(n-1) 测OD值 3 5 7 9 11 13 15 17 x
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